Ativação de recombinases em loci de DNA específicos por meio de inserções de domínio de dedo de zinco

Título	Ativação de recombinases em loci de DNA específicos por meio de inserções de domínio de dedo de zinco
Autores	Liliya Mukhametzyanova, Lukas Theo Schmitt, Julia Torres-Rivera, Teresa Rojo-Romanos, Felix Lansing, Maciej Paszkowski-Rogacz, Heike Hollak, Melanie Brux, Martina Augsburg, Paul Martin Schneider, Frank Buchholz
Revista	Biotecnologia da natureza
data	01/31/2024
Doi	10.1038/s41587-023-02121-y
Introdução	As recombinases são uma alternativa vantajosa para a edição do genoma em relação às nucleases e outras enzimas. No entanto, sua modificação para atingir DNA específico de forma eficiente envolve tempo e esforço significativos. Esta pesquisa utiliza domínios de ligação de DNA de dedo de zinco (ZFDs) para orientar a ligação da recombinase, integrando ZFDs em sequências de recombinase. Por meio da triagem de bibliotecas de proteínas híbridas, aprimoramos o local de inserção, o comprimento da ligação, o espaçamento e a orientação do ZFD, criando recombinases do tipo Cre que são ativadas somente quando o ZFD se liga próximo ao local da recombinase. Essa fusão aumentou a eficiência da edição da recombinase em quatro vezes e eliminou os efeitos fora do alvo em células de mamíferos. Nossa atividade de recombinase dependente de ZFD pode ser transferida para recombinases com especificidade mais ampla, possibilitando recombinases totalmente programáveis. Essas recombinases projetadas aprimoram a edição do genoma com maior precisão e eficiência.
Citação	Liliya Mukhametzyanova, Lukas Theo Schmitt e Julia Torres-Rivera et al. Activation of recombinases at specific DNA loci by zinc-finger domain insertions. Nat. Biotechnol. 2024. Vol. 42(12):1844-1854. DOI: 10.1038/s41587-023-02121-y
Elemento	Zinco (Zn)
Materiais	Biopolímeros
Indústria	Indústria farmacêutica