Desimunização para terapia gênica: a correspondência com o hospedeiro de construções sintéticas de dedo de zinco permite a repressão a longo prazo da Huntingtin mutante em camundongos

Título	Desimunização para terapia gênica: a correspondência com o hospedeiro de construções sintéticas de dedo de zinco permite a repressão a longo prazo da Huntingtin mutante em camundongos
Autores	Carmen Agustín-Pavón, Michal Mielcarek, Mireia Garriga-Canut, Mark Isalan
Revista	Neurodegeneração molecular
data	09/06/2016
Doi	10.1186/s13024-016-0128-x
Introdução	As proteínas sintéticas do tipo dedo de zinco (ZF) são projetadas para atingir sequências específicas de DNA, oferecendo uma abordagem promissora para a terapia gênica. Nossa pesquisa anterior introduziu um repressor de transcrição ZF, ZF-KOX1, que se liga às repetições CAG expandidas dentro do gene da doença de Huntington (DH), HTT, reduzindo efetivamente a expressão mutante e retardando os sintomas neurológicos em um modelo de DH de camundongo por até 3 semanas. Esse estudo tem como objetivo estender a duração dos efeitos da terapia gênica por meio de uma única injeção no cérebro. Reconhecendo a possível resposta imune a proteínas estranhas, desenvolvemos um análogo de ZF-KOX1 compatível com o hospedeiro, o mZF-KRAB, para um tratamento mais seguro em camundongos, juntamente com a administração do vetor rAAV. Também avaliamos o promotor da enolase específica do neurônio (pNSE) quanto à sua capacidade de manter a expressão do transgene a longo prazo, esperando manter a repressão da HTT por até 6 meses após a injeção. As descobertas revelaram respostas inflamatórias significativas e perda neuronal moderada ao usar ZF-KOX1 ou GFP não compatíveis com o hospedeiro, enquanto o mZF-KRAB evitou esses problemas. Apesar de um declínio na expressão de ZF induzido pelo promotor pCAG em 6 semanas, o uso de um promotor de enolase específico para neurônios manteve até 77% de repressão da HTT mutante em todo o cérebro 3 semanas após a injeção, com efeitos de repressão persistindo em 48% e 23% em 12 e 24 semanas, respectivamente. Esses resultados sugerem o potencial para tratamentos de longo prazo com construções ZF-AAV adaptadas ao hospedeiro, mostrando toxicidade reduzida e melhor expressão da proteína ZF e repressão gênica.
Citação	Carmen Agustín-Pavón, Michal Mielcarek e Mireia Garriga-Canut et al. Desimunização para terapia gênica: a correspondência com o hospedeiro de construções sintéticas de dedo de zinco permite a repressão a longo prazo da Huntingtin mutante em camundongos. Mol Neurodegener. 2016. Vol. 11(1). DOI: 10.1186/s13024-016-0128-x
Materiais	Biomateriais
Indústria	Indústria farmacêutica