Faseamento experimental com vanádio e aplicação a proteínas de membrana de ligação a nucleotídeos

Título	Faseamento experimental com vanádio e aplicação a proteínas de membrana de ligação a nucleotídeos
Autores	Kamel El Omari, Nada Mohamad, Kiran Bountra, Ramona Duman, Maria Romano, Katja Schlegel, Hok-Sau Kwong, Vitaliy Mykhaylyk, Claus Olesen, Jesper Vuust Moller, Maike Bublitz, Konstantinos Beis, Armin Wagner
Revista	IUCrJ
data	10/14/2020
Doi	10.1107/S2052252520012312
Introdução	A determinação da estrutura de proteínas solúveis e de membrana geralmente é complicada pelo problema da fase cristalográfica, especialmente sem uma estrutura homóloga semelhante. Embora a fase experimental seja a preferida para novas estruturas, ela tradicionalmente exige a derivatização de átomos pesados, o que é desafiador e demorado. Este artigo apresenta um método novo e rápido para a obtenção de fases experimentais para a determinação da estrutura de proteínas por meio do faseamento de vanádio. O vanadato, um análogo do estado de transição das reações de transferência de fósforo, liga-se especificamente ao local ativo de muitas enzimas envolvidas nesse processo. A eficácia da técnica foi confirmada pela determinação das estruturas de três complexos proteína-vanádio, incluindo duas proteínas integrais de membrana: Ca2+-ATPase do retículo sarcoplasmático de coelho, o transportador de cassete de ligação de ATP McjD de Escherichia coli e a enzima solúvel RNAse A de Bos taurus. Esse método foi bem-sucedido mesmo em baixa resolução e apesar da anisotropia significativa dos dados. Aplicável a várias proteínas em seis das sete classes da Comissão de Enzimas, ele depende exclusivamente da química específica da proteína e não requer modificações, aprimorando o kit de ferramentas de faseamento. Além de seus recursos de faseamento, os complexos de proteína-vanádio fornecem percepções detalhadas sobre os mecanismos de reação das proteínas estudadas.
Citação	Kamel El Omari, Nada Mohamad e Kiran Bountra et al. Experimental phasing with vanadium and application to nucleotide-binding membrane proteins (Faseamento experimental com vanádio e aplicação a proteínas de membrana de ligação a nucleotídeos). IUCrJ. 2020. DOI: 10.1107/S2052252520012312
Elemento	Vanádio (V)
Materiais	Compostos químicos
Temas	Materiais biomédicos
Indústria	Pesquisa e laboratório